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新的检测方法鉴定细菌感染较培养方法更快

一种使用阳性血培养、自动DNA聚合酶链反应和基因芯片的检测方法可准确鉴定脓毒血症的病原菌,并且较标准培养方法的检测速度大为提高。

根据12月10日在线发表于《柳叶刀》(Lancet)的一篇文章报告,在疑似脓毒血症的患者中使用这种检测方法鉴定细菌种类的灵敏度为95%,特异度为99%,平均检测周期为23h,而标准培养方法的平均检测周期则长达41.5~48h。

尽管这种脓毒血症检测方法是一“重大进步”,其将最先进的核酸分析技术与标准培养方法相结合,但较标准操作提前18h确定病原菌种类能否“转化为与额外检测费用相称的明显临床受益”尚在未知之列,斯坦福大学(加利福尼亚州)的Shin Lin博士和巴尔的摩市约翰霍普金斯大学的Samuel Yang博士评论道,这两位学者均未参与该研究(Lancet 2009 Dec. 10 [doi:10.1016/S0140-6736(09)61791-8])。

在这项研究中,赫尔辛基大学医院实验室的Päivi Tissari博士及其同事将待检验的脓毒血症检测方法与标准血液培养和病原菌鉴定方法进行了比较,待检验方法的设备和试剂均由总部设在赫尔辛基市的Mobidiag公司提供。研究分析了3,318份来自两个大型学术医学中心的疑似脓毒血症患者的血液标本(Lancet 2009 Dec. 10 [doi:10.1016/S0140-6736(09)61569-5])。

在多数脓毒血症患者标本中检出的致病菌为50余种革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌。

共2,107份血液培养标本检测结果为阳性,其中包括1,807份采用新的脓毒血症检测方法鉴定为阳性的标本。当这种检测方法与标准血液培养方法所观察到的结果不一致时,研究者将对标本的拓扑异构酶DNA序列、16S rRNA基因和原始微生物学实验室数据进行比较。

关于新的脓毒血症检测方法可检出的微生物,在血液培养方法检出的所有细菌种类中,除1种以外,新方法的检测结果与血液培养方法结果的一致率达到93%~100%。新的检测方法可检出血液培养方法鉴定出的163种凝固酶阴性葡萄球菌中的133种。

在使用新的检测方法分析的3,318份标本中,共52份出现假阳性结果。这52份假阳性标本中包括34份因污染或软件故障而被排除的标本;11份较传统血液培养方法检出更多的细菌种类;3份的结果报告为表皮葡萄球菌,而正确结果应为凝固酶阴性葡萄球菌;3份标本中出现假阳性结果的原因为不同细菌种类之间交叉杂交,在1份标本中,新的检测方法另外检出了脆弱拟杆菌。

在34份标本中,因对某些菌种的灵敏度不足而产生假阴性结果;在另外60份标本中,新的脓毒血症检测方法未能检出所有应检出的菌种。这种方法在处理多种微生物感染标本时也存在缺陷。

对于39份标本,待检验检测方法与参照方法间中位检测周期差异为18h 19min (范围为17h 29min至43h 8min)。

对于甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌,这种检测方法的灵敏度和特异度均为100%,但与标准生物化学分析方法不同,这是此方法可以进行的唯一一种抗生素耐药性检测。

“考虑到这些特征,待检验的脓毒血症检测方法尚无法取代标准方法,但可以与之并行使用,” Lin博士和Yang博士写道。

研究者中的5位受雇于Mobidiag公司,该公司负责提供待检验检测方法所需的设备和试剂。其他研究者均声明无任何利益冲突。Lin博士和Yang博士报告无任何利益冲突。研究未接受任何外来资助。

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