圆环基因工程亚单位疫苗：这些知识不可忽视
圆环基因工程亚单位疫苗
这些知识不可忽视
《农财宝典》新牧网 记者 李丹
近年来随着基因工程研究的突破，基因工程苗逐步进入业内人士的眼帘，禽法氏囊亚单位疫苗、猪用圆环病毒亚单位疫苗等相继问世，猪瘟E2蛋白亚单位疫苗等即将上市。基因工程苗仅是个统称，根据不同的制备方法以及基因改造分为：合成肽苗、亚单位疫苗、颗粒载体疫苗、病毒活载体疫苗、细菌活载体疫苗、基因重配疫苗以及基因缺失疫苗。
目前圆环基因工程疫苗主要是载体疫苗，分大肠杆菌载体与昆虫杆状病毒载体，属于两种不同的表达系统。利用各种表达系统生产圆环疫苗的难点在于载体的改造技术，改造得当，表达则精确，错误率低，杂质就少。
基因工程苗怎么生产的？
基因工程疫苗是将编码病原的保护性抗原的基因片段克隆入表达载体，用以转染细胞或真核细胞微生物及原核细胞微生物后得到的产物，制成疫苗，或者将病原的毒力相关基因删除掉，使成为不带毒力相关基因的基因缺失苗。目前的圆环基因工程疫苗即是利用基因工程方法，取出微生物中编码保护性抗原肽段的基因与质粒等载体重组，导入受体菌（细菌、杆状病毒细胞 ），使之高效表达，产生大量保护性肽段，提取后加入佐剂，即成为亚单位苗。青岛易邦公司研发的猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗就是基因工程的典型代表，是利用大肠杆菌为载体来表达猪圆环2型病毒的Cap蛋白，并能形成典型病毒样颗粒（VLPs），这是蛋白表达的最理想状态。
为何要开发基因工程苗？
随着畜禽饲养规模的增加和饲养方式的变化，在动物疫情日渐复杂以及新病原和变异株的不断出现的新形势下，传统疫苗在生产和应用过程中的局限性愈来愈明显：有些病原不适宜用常规方法培养，很难用传统技术制备疫苗；有些病原灭活条件严格，灭活不当会人为造成疫病流行；有些减毒活疫苗的病原存在毒力返强或与田间野毒发生重组的风险；疫苗在田间的免疫效果受母源抗体影响严重；有些疫苗需多次接种，应激反应大且人工耗时费力。而随着DNA重组技术的发展，基因工程疫苗应运而生。
而圆环病毒在细胞上的培养增值相对比较困难：①圆环病毒生长缓慢、培养成本高、生产法周期长。②圆环病毒的灭活比较困难，需要利用化学试剂。③培养过程会产生大量的杂质（灭活剂、细胞碎片、血清等），很容易引起免疫应激。
在这种情况下，利用基因工程技术，能够高效准确地表达保护性抗原，并且抗原含量比较纯，且表达的量好控制。
不同载体的基因工程苗有何区别？
目前生产圆环基因工程疫苗的载体主要是大肠杆菌与昆虫杆状病毒这两个载体。都是国际上运用率最高且很成熟的两个工程菌与细胞载体。其中利用大肠杆菌研制的人戊型肝炎疫苗和人乳头瘤病毒疫苗已经进入临床使用。不管哪种载体表达，首先要进行载体的改造，让其更加精确地表达目标抗原。而不同载体表达的基因工程疫苗区别就在于这种"改造"，改造成功的能够精准表达目标抗原，错配率低，杂质少，抗原含量纯且高。
因此，生产高质量的圆环基因工程疫苗并非易事：首先需要通过对工程菌的改造以及目标蛋白的纯化。据悉，青岛易邦在在工程菌培养与表达蛋白的提纯方面做了大量的研究工作，首先是对基因工程菌的改造，令其更加适合并且精准表达圆环病毒的cap蛋白，并形成典型病毒样颗粒（VLPs），其次在疫苗的半成品中，适时检测其有效蛋白的含量，全程保证有效蛋白含量。此外，在疫苗生产的过程中，适时检测半成品与成品的抗原含量最大程度上保证产品质量始终如一。
"易圆净的生产集合了基因工程、发酵工程、蛋白提取工程三大工程的成果，首先利用基因工程构建工程菌，然后利用发酵工程实现工程菌高密度发酵培养与诱导，实现了目的蛋白的高效可溶性表达，蛋白提取对表达产物进行多级纯化和杂质或异物的除去。"据青岛易邦董事长兼总经理杜元钊介绍，青岛易邦的圆环苗（易圆净）有效成分是具有类病毒样颗粒的cap蛋白，被机体识别能产生很好的细胞免疫。配以使用水性佐剂+免疫增效剂COPOLYTM，注射方便，效果更强。
什么样的基因工程苗堪称完美？
基因工程苗的核心技术在于表达的精准性以及佐剂的选择。而完美的圆环病毒表达应该是病毒样颗粒抗原（VLPs），与天然的病毒有着极其相似的形态和空间结构，具有很强的免疫原性，但又不含有核酸，无感染性，非常安全。表达的病毒样颗粒抗原（VLPs）进入机体后，它可通过与病毒自然感染一样途径来刺激机体的免疫系统，能高效诱导机体产生很强体液和细胞免疫。经过对工程菌的改造后，青岛易邦的圆环基因工程苗在大肠杆菌表达体统表达出来的目标抗原拥有完美的VLPs.
此外，佐剂的选择对基因工程苗有着至关重要的作用。据悉，青岛易邦的"易圆净"是使用水性佐剂+免疫增效剂COPOLYTM，让能最大程度激发疫苗的免疫原性的同时，注射方面，水性佐剂，没有应激，如此一来使基因工程亚单位疫苗锦上添花。
但是我们也必须注意，佐剂只是让我们的疫苗效果更加完美呈现的辅助，不是我们的进行防疫和疫苗选择的主体，但是由于个别厂家的过度宣传或错误的引导，导致许多养殖户在进行疫苗选择时过度的关注疫苗的佐剂而忽略疫苗的根本是具有免疫原性的有效抗原的含量。
目前市面上的基因工程亚单位疫苗都是水佐剂疫苗，在吸收效果、通针性、副反应方面都有油苗无可比拟的先进性！病毒样颗粒抗原（VLPs）与水佐剂相辅相成。只有病毒样颗粒（VLPs）没有水性的佐剂，则不能充分发挥亚单位疫苗的先进性，只有水性佐剂而没有病毒样颗粒（VLPs），则只是炒作水佐剂的概念，没有实际效果，最终被广大用户识破并抛弃！